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利用GST融合蛋白沉淀技术,将目的蛋白和GST标签蛋白融合并在细菌中表达,经纯化获得融合表达蛋白。其原理是将靶蛋白-GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,用作对靶具有逆亲和性的支持物,并作为诱饵蛋白。目标蛋白质溶液被包裹和纯化,从而可以捕获与其相互作用的捕获的蛋白质,并且可以洗脱缀合物。可以通过SDS-page电泳分析或WB和MS检测来验证蛋白质之间的相互作用或获得相应的目标蛋白质。我公司将磁珠结合捕获形成复合物形式,从而更灵敏、更有针对性地获得结合蛋白:磁珠与GST抗体孵育,再与样品裂解液孵育,形成磁珠-GST抗体-GST融合蛋白-相互作用结合蛋白复合物,再纯化获得目标结合蛋白。
服务流程:
1.GST-靶蛋白融合表达载体的构建
2.GST标记抗体和WB检测融合蛋白的表达。
3.细胞裂解获得总蛋白裂解物。
4.GST-相互作用结合蛋白的下拉检索
5.纯化结合蛋白。
客户提供:
1.含有融合蛋白表达的样品已被验证(用于验证融合蛋白表达的WB结果图)
2.GST标记抗体可用于WB检测和IP实验。
如期提供:
1.原始数据和结果图片
2.标准实验报告
3.SCI标准结果图
2.2项目名称:RNA下拉/检测RNA与其结合蛋白的相互作用。
技术服务描述
RNA下拉是检测RNA结合蛋白与其靶RNA相互作用的主要实验手段之一。RNA下拉生物素RNA探针通过体外转录进行标记,然后与细胞质蛋白提取物一起孵育,形成RNA-蛋白复合物。该复合物可以与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育溶液中的其他成分分离。洗脱复合物后,通过Western Blot实验检测特异性RNA结合蛋白与RNA的相互作用。
服务流程/程序
1.根据研究目的决定研究计划。
2.DNA序列的克隆
3.RNA生物素探针的合成
4.RNA下拉实验
5.蛋白质印迹试验(如果需要质谱分析,请单独咨询)
6.数据分析和图形制作
服务优势
1.它可以识别RBP和RNA模体预测的组合,更有说服力。
2.蛋白质印迹检测具有较高的精确度。
3.提供完全控制,结果更加精确。
4.结果提供SCI标准图,可直接用于文章。
客户提供
1.目的蛋白抗体(可用于Western Blot)及其说明书。
2.待检测的细胞样本
3.目标基因和目标蛋白的信息
如期提供
1.原始数据和结果图片(包括输入、阳性和阴性对照结果)
2.标准实验报告(包括详细的材料和方法)
3.SCI标准结果图
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